再续“寻理”淋巴瘤病理教育系列网络会议第六期——病理诊断与病理技术对话专场已于2020年11月5日顺利进行。五位教授：福建省肿瘤医院陈刚教授、空军军医大学西京医院胡沛臻教授、华中科技大学同济医学院附属协和医院潘华雄教授、江西省人民医院刘勇教授、中国科学技术大学附属第一医院王伟教授在线直播，吸引了一千余名观众在线观看，直播长达3小时，为广大病理科医生带来了一场淋巴瘤病理学习与交流的学术盛宴。在此，我们总结了各位专家的直播亮点及诊断经验，并提供了回放链接，以便各位医师后续学习。
亮点回顾
首先，大会主席陈刚教授对今日讲者进行了简单介绍，并指出本期为病理诊断与病理技术对话专场。他提到，四位专家将从不同维度切入进行深入讲解，与各位病理同仁一同探讨病理诊断与技术。本次直播采用病例分享 专家诊断经验分享 知识问答互动的形式，更加强调淋巴瘤诊断的实操性，希望可以帮助病理医生不断提高淋巴瘤诊断水平。
胡沛臻教授：病理标本规范化前处理——病理诊断全流程管理第一步
诊断经验语录：10%福尔马林溶液（1瓶500ml甲醛溶液 4500ml缓冲液）=4%甲醛溶液
胡教授从标本固定的重要性、标本规范化前处理示例、病理检查申请单及标本签收、术中病理标本送检四个方面详细地介绍了临床上应如何进行标本固定。
亮点1：标本固定的重要性
胡教授提到，在病理工作中，组织固定对病理诊断具有重要意义。如今，分子检测的发展对石蜡组织也提出了新要求：
2015年国家卫计委发布的《病理专业医疗质量控制指标》中提出，标本要“以足量10%中性缓冲福尔马林充分固定”。胡教授为大家讲解了该固定液的配制方法，并且建议使用商品化固定液，注意及时更换，以保证固定液质量合格。此外，在固定时间上，不同组织也有着不同的要求。
亮点2：标本固定要求——及时固定
有研究指出，ER/PR/HER2等标记在半小时内固定最佳，超过48h几乎看不到标记。冷缺血时间大于3h后，HE/IHC/FISH/DDISH的结果也与正确结果差异较大。
除了固定不及时，固定不佳、固定剂质量欠佳、固定液量不足、处理标本不规范等也可能影响最终病理诊断结果。
亮点3：FFPE组织规范固定要点
亮点四：术中病理诊断的局限性、适应症与禁忌症
术中病理诊断有其适应症与禁忌症，也有其局限性。例如，术中冰冻可能产生冰晶，影响诊断。因此，在诊断过程中应当注意。
最后，胡教授总结到，标本规范化前处理是病理诊断质量保证的首要前提。应让临床医生尽可能提供患者资料，并于与之进行良好有效的沟通。希望能与临床医师共同努力，提高病理诊断的含金量。
潘华雄教授：免疫组化染色质控——病理医生的作用
潘教授首先强调了免疫组化质量的重要性。紧接着，他通过几个实际案例，分析归纳了病理诊断中常见的三种染色问题——假阳性、假阴性与染色不均，并提出了不同问题所对应的解决方案。
亮点1：不同角色在质控中的优劣势
技术员：可监控外对照，发现高背景或染色不均。但不能发现内对照染色失败，也无法监控所有指标。
试剂厂家：标准流程下一抗与二抗的匹配性，可以通过一抗二抗同时封闭来体现；自动化染色机也可解决染色的标准化流程问题。但时效性差，且不能发现内对照染色失败；此外，不同试剂厂家产品质量可能存在质的区别。
质控中心：质控指标有限，同样具有时效性的问题。
病理医生：可监控所有指标，解决时效性问题。病理医生比较熟悉各种抗体的表达谱，容易发现异常；但病理医生对技术的不熟悉也会阻碍质控的有效进行。
因此，潘教授指出，质控是一个系统性工程，涉及到临床、技术员、试剂厂家及医生，需要良好的协调能力，涉及到专业诊断能力，质控人只能是病理科主任或高年资诊断医生。
亮点二：免疫组化前组织处理过程中可能会出现的问题
亮点3：病理医生在质控中的责任
潘教授提到，病理医生的作用是通过切片观察识别技术环节的问题，并提出解决方案。他通过七个案例分享，展示了免疫组化质控过程中可能出现的现象，详细分析了其原因，并提出了解决方案。（详见直播回放）
亮点4：质控小结
刘勇教授：病理技术对精准诊断的重要性
诊断经验语录：精准诊断，技术先行！
刘教授分别从取材规范性、染色标准化、结构特征、免疫组化在精准诊断中的作用、标本处理、组织芯片在实验对照中的作用、免疫组化结果判定与解释以及正常组织结构特征等方面进行了深入浅出的讲解，并辅以丰富的案例分享，强调病理技术标准化是精确诊断的基础。
亮点1：滤泡沿着被膜和小梁分布，当淋巴结未从门部切开，而取材在小梁旁时，免疫组化呈现B表型（CD20 ）；但低倍观呈现结节感，尤其是在没有染色的小梁旁。若不能识别，易误诊为B系淋巴细胞增生或者肿瘤。
亮点2：核内包涵体是浆细胞淋巴瘤诊断的重要线索，固定或晾片不足可能会出现“假假包涵体”。
亮点3：若标本未固定好，可能导致内部组织自溶，影响IHC或FISH结果。
亮点4：免疫组化结果是客观的，但是对于免疫组化结果的解释往往是主观性的。例如，对同一张涂片目标细胞设定不同，判读结果有可能完全不同。
最后，刘教授提到，免疫组化技术延伸了我们的眼睛，“三位一体”——定性可靠、定位准确、定量可能，也使得其在精准病理诊断中发挥着重要的作用。
王伟教授：淋巴瘤分子病理检测及临床应用
诊断经验语录：分子病理从分子生物学和遗传学的维度，辅助淋巴瘤病理诊断，并预测预后和指导治疗。
王教授从淋巴瘤的分子病理检测（包括IGH/TCR克隆性重排、染色体异常、基因突变、表达谱差异）与分子病理检测的临床应用两方面为我们进行了全面、系统地讲解，并通过大量文献印证了分子病理对临床治疗及预后的重要意义。
亮点1：淋巴瘤中常见的染色体异常
B-NHL（非霍奇金淋巴瘤）通常具有固定的基因表型，多表现为染色体易位，从而导致近染色体重组位点的原癌基因表达上调。T-NHL的染色体易位相较B-NHL较少。
NHL的部分重现性易位及其靶基因
亮点2：分子病理常用技术简介
亮点3：FISH检测可辅助诊断的淋巴瘤类型
亮点4：分子检测对临床具有指导意义
WHO最新分类中引入了更多的分子遗传学改变信息，涉及淋巴瘤的分类、机制、预后及治疗，可见分子检测对临床具有重要的指导意义。
在这里，王教授帮助大家鉴别了双打击与双表达。双打击淋巴瘤较双表达型预后差（中位生存时间0.2-1.5年），且目前缺乏标准的治疗方案。
最后，王教授总结到，分子病理可以辅助淋巴瘤病理诊断，并指导预后和治疗。尽管分子检测时代已经到来，但传统工具仍有很大的意义，当共同协作。
习题回顾
1. 福尔马林固定液使用什么液体配置？
A. 自来水
B. 纯净水
C. 矿泉水
D. PBS
E. 双蒸水
2. 抗S-100蛋白抗体的阳性信号定位于？
A. 细胞核
B. 细胞膜
C. 细胞质
D. 细胞核和胞质
E. 细胞膜和胞质
3. “双打击”B细胞淋巴瘤主要涉及MYC和BCL-2的基因重排，下列哪种技术用于相关检测？
A. 免疫组化
B. 荧光原位杂交
C. Sanger测序
D. 高通量测序
E. 流式细胞术
如果您想查看本场直播回放，请点击“阅读原文”
下期预告
再续“寻理”淋巴瘤病理教育系列网络会议第七场直播时间：11月20日，主题：病理诊断与临床治疗对话。大会主席：郑州大学第一附属医院李文才教授，讲者：天津医科大学肿瘤医院翟琼莉教授、浙江大学医学院附属第一医院王照明教授、河南省肿瘤医院夏庆欣教授、郑州大学第一附属医院王新华教授。
